Cardiovascular Disease in Women With Breast Cancer: A Contemporary Review

Abstract Breast cancer (BC) is the most common malignant neoplasia in women and is responsible for one in six deaths from cancer in the female population. Five years after diagnosis, BC survival rates currently exceed 80%. Cardiovascular disease (CVD) is a frequent cause of morbidity and mortality in BC, mainly in patients receiving cardiotoxic drugs (anthracyclines, immunotherapy) and radiotherapy (RT). CVD and BC have common risk factors (RF), which are related to aging, traditional and cardiometabolic RFs (obesity, dyslipidemia, consumption of alcoholic beverages), and others associated with sex and reproductive women's age, such as early menarche, late menopause, nulliparity, use of oral contraceptives, as well as hormone replacement therapy in postmenopause. Risk stratification and the promotion of an ideal state of cardiovascular (CV) health are fundamental in preventing CVD in survivors. Therapeutic management and follow-up of patients with BC require a multidisciplinary team to reduce complications and mortality of CV origin.

Third National Registry of Cardiac Rehabilitation Programs in Mexico (RENAPREC III-2022) / Tercer Registro Nacional de Programas de Rehabilitación Cardiaca en México (RENAPREC III-2022)

Abstract Introduction: In Mexico, cardiac rehabilitation (CR) as an interdisciplinary intervention with therapeutic impact in patients with heart disease is growing. There is the need to know actual conditions of CR in our country. Objectives: The objective of this National Registry is to follow-up those existing and new CR units in Mexico through the comparison between the two previous registries, RENAPREC-2009 and RENAPREC II-2015 studies. This is a descriptive study focused on diverse CR activities such as assistance training, and certification of health professionals, barriers, reference, population attended, interdisciplinarity, permanence over time, growth prospects, regulations, post-pandemic condition, integrative characteristics, and scientific research. Results: Data were collected from 45 CR centers in the 32 states, 75.5% are private practice units, 67% are new, 33% were part of RENAPREC II-2015, and 17 have continued since 2009. With a better distribution of CR units along the territory, the median reference of candidates for CR programs is 9% with a significant reduction into tiempo of enrollment to Phase II admission (19 ± 11 days). Regarding to previous registries, the coverance of Phases I, II, and III is 71%, 100%, and 93%, respectively; and a coverance increases in evaluation, risk stratification, and prescription, more comprehensive attendance and prevention strategies. Conclusions: CR in Mexico has grown in the past 7 years. Even there is still low reference and heterogeneity in specific processes, there are strengths such as interdisciplinarity, scientific professionalization of specialists, national diversification, and an official society that are consolidated over time.

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Influence of bioceramic intracanal medication on the bond strength of bioceramic root canal sealer

Abstract To investigate the influence of the remaining volume of a new intracanal medication based on bioceramic compounds on the bond strength (BS) and formation of an adhesive interface between calcium silicate-based and epoxy resin-based root canal sealers. For this purpose, the specimens were distributed according to the intracanal medication (n = 26): Bio-C Temp (BCT) and Ultracal XS (UXS). The roots were scanned in microCT, and after 7 days, the medication was removed. Then a new scan was performed to evaluate the volume of medication remaining. Subsequently, 40 specimens were redistributed into 2 subgroups (n = 10) and filled according to the sealer used: AH Plus (AHP) and Bio-C Sealer (BCS), to assess the bond strength by using the push-out test, and the adhesive interface by confocal laser fluorescence microscopy (CLSM) and scanning electron microscopy (SEM). The t test showed a smaller remainder of BCT (1.77 ± 0.86) compared with UXS (10.47 ± 5.78), irrespective of the root third evaluated. The BS showed that teeth with BCT + BCS had higher bond strength values (3.70 ± 1.22) when compared to the other groups: BCT + AHP (2.15 ± 1.07), UXS + BCS (3.18 ± 1.09) and UXS + AHP (2.11 ± 1.02) (p<0.001). The cervical third had higher BS when compared with the middle and apical thirds (p < 0.001), and higher number of adhesive failures. The adhesive interface in SEM and CLSM images showed better adaptation for the association between BCT + BCS. Intracanal medication and silicate-based endodontic sealer appeared to interact chemically by forming a biomineralizing layer, allowing for an increase in the bond strength and forming an adhesive interface between the materials, with no or less gap formation.

Anti-leishmanial activity of 29 daily sessions of intralesional-pentavalent antimony administration on Leishmania (Viannia)-infected BALB/c mice / Actividad antileishmania de 29 sesiones diarias de antimonio pentavalente intralesional en ratones BALB/c infectados con Leishmania (Viannia)

Abstract Introduction: Intralesional-pentavalent antimonials (IL-SbV) are recommended for simple cutaneous leishmaniasis (CL). Few treatment sessions (1-5) and drug volumes (1-5 ml each), relative to lesion size (LS), are recommended. There is not a validated IL-SbV protocol using doses calculated as mg/kg body weight and administered over a large number of IL-sessions, with small injection volumes. Objective: The study aim was to determine the efficacy of different concentrations of IL-SbV administered in 29 daily sessions of 100 μL each, on CL infected mice. Methods: Leishmania (Viannia) panamensis and L. (V.) braziliensis-infected mice (N = 6) were treated with 150, 50, and 16.6 mgSbV/kg/day x 29 days. Percentage of lesion area reduction, aesthetic and final (no lesions, no parasites) efficacy and effective dose (ED)50 were determined. In vitro-SbV activity against parasites was evaluated for both species. Results: The ED50 values were 72.2 and 66.3 (at the end of treatment), 54.3 and 37.7 (15-days pt.), and 145.3 and 148.6 (60-days pt.) for each species, respectively. Differences were observed between Leishmania species at 15-days pt., but not later. At 60-day pt., IL-SbV-150 mg showed final cure rates of 66.6 % for L. (V.) panamensis and 33.3 % for L. (V.) braziliensis-infected mice. After 15 days pt., lesion reactivation was observed in some "aesthetically cured" mice. Glucantime was not active in in vitro assays. Conclusions: The IL-SbV use with a dose calculated as mg/kg body weight and administered over a large number of IL-sessions, with small injection volumes each day could be effective against L. (V.) panamensis and L. (V.) braziliensis-CL infection. An appropriate SbV-dose (higher than 150 mg/kg/day x less than 29 days) must be evaluated.

Resumen Introducción: Los antimoniales pentavalentes aplicados intralesionalmente (IL-SbV) se recomiendan para el tratamiento de la leishmaniasis cutánea (LC) simple. Se recomiendan pocas sesiones (1-5) y volúmenes (1-5 ml cada uno) en relación con el tamaño de la lesión (LS). No existe un protocolo de IL-SbV validado que utilice dosis calculadas según el peso corporal (en mg/kg) y administradas durante varias sesiones en pocos volúmenes de inyección. Objetivo: El objetivo del estudio fue determinar la eficacia de diferentes concentraciones de IL-SbV administradas en 29 sesiones diarias de 100 μL cada una, en ratones con LC. Métodos: Ratones infectados con L. (V.) panamensis y L. (V.) braziliensis (N = 6) fueron tratados intralesionalmente con 150, 50 y 16,6 mg SbV/kg/día x 29 días. Se determinó el porcentaje de reducción del área de la lesión, la eficacia estética y final (sin lesiones, sin parásitos) y la dosis efectiva (DE)50. Adicionalmente de evaluó la actividad in vitro del SbV. Resultados: Los valores de DE50 fueron 72.2 y 66.3 (al final del tratamiento), 54.3 y 37.7 (15 días pt) y 145.3 y 148.6 (60 días pt) para cada especie. Se encontraron diferencias entre las especies sólo a los 15 días pt. La eficacia del tratamiento IL-SbV-150 mg, 60 días pt., fue de 66.6 y 33.3 % en ratones infectados con L. (V.) panamensis L. (V.) braziliensis respectivamente. Después de 15 días pt., se observó reactivación de la lesión en algunos ratones "estéticamente curados". Glucantime no fue activo in vitro. Conclusiones: El uso intralesional de SbV con una dosis calculada en mg/kg de peso corporal y administrada durante varias sesiones, con pequeños volúmenes de inyección cada día, podría ser eficaz en LC por L. (V.) panamensis y L. (V.) braziliensis. Dosis adecuadas de SbV (superiores a 150 mg/kg/día x 20) deben evaluarse.

Antigenemia temprana de Cryptococcus en pacientes asintomáticos VIH positivos en Barranquilla, Colombia / Cryptococcus early antigenemia in HIV positive asymptomatic patients in Barranquilla, Colombia

Resumen La criptococosis meníngea presenta alta mortalidad mundial, especialmente en población VIH/sida. La OMS recomienda detectar el antígeno capsular de Crypto coccus como estrategia para un diagnóstico temprano y poder minimizar complicaciones. Objetivo: realizar antigenemia temprana de Cryptococcus mediante in munocromatografía/ensayo de flujo lateral en pacientes asintomáticos VIH+. Material y método: estudio descriptivo observacional; entre julio-2016 y mayo-2019 se procesaron mediante ensayo de flujo lateral, muestras de suero de 169 pacientes asintomáticos VIH+, con CD4 ≤120 cel/μL en Barranquilla, Colombia. Ante resultado positivo, se indicó profilaxis con fluconazol; se hizo seguimiento a todos los casos. Resultados: la antigenemia fue positiva en cinco pacientes (2,96%); uno falleció, cuatro recibieron profilaxis y la prueba se negativizó en dos. Los pacientes con resultado negativo inicial no desarrollaron durante el estudio sinto matología compatible con esta micosis. Discusión: el ensayo de flujo lateral de Cryptococcus está recomendado para el diagnóstico temprano de la criptococosis en población VIH/sida. Conclusión: detectar tempranamente el antígeno circulante de Cryptococcus mediante ensayo de flujo lateral en pacientes asintomáticos VIH+, permitió instaurar profilaxis oportuna, hacer seguimiento y control para reducir la mortalidad asociada con la criptococosis meníngea.

Abstract Meningeal cryptococcosis presents high levels of global mortality, especially in the HIV/AIDS population. The WHO recommends detecting the capsular antigen as an important strategy for early diagnosis and be able to minimize complications. Objective: Perform early cryptococcal antigenemia by immunochromatographic/ lateral flow assay in asymptomatic HIV+ patients. Material and method: descriptive observational study; between July-2016 and May-2019, serum samples from 169 asymptomatic HIV+ patients with CD4 ≤120 cells/μL were processed by lateral flow assay in Barranquilla, Colombia. Given a positive result, prophylaxis with fluconazole was indicated; all cases were followed up. Results: antigenemia was positive in five (2.96%) patients; one died; four received prophylaxis, and the test turned negative in two. The patients with an initial negative result, did not developed symptoms compatible with this mycosis during the study period. Discussion: lateral flow assay for Cryptococcus is recommended for the early diagnosis of cryptococcosis in the HIV/AIDS population. Conclusion: early detection of circulating Cryptococcus antigen by lateral flow assay in HIV+ patients allowed the establishment of timely prophylaxis, follow-up, and control to reduce mortality associated with meningeal cryptococcosis.

Sensibilidad in vitro a benznidazol, nifurtimox y posaconazol de cepas de Trypanosoma cruzi de Paraguay / In vitro susceptibility to benznidazole, nifurtimox and posaconazole of Trypanosoma cruzi isolates from Paraguay

Resumen: Introducción. Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas, exhibe una sustancial heterogeneidad fenotípica y genotípica que puede influir en las variaciones epidemiológicas y clínicas de la enfermedad, así como en la sensibilidad a los fármacos utilizados en el tratamiento. Objetivo. Evaluar la sensibilidad in vitro al benznidazol, el nifurtimox y el posaconazol de 40 cepas clonadas de T. cruzi de Paraguay, con distintos genotipos, huéspedes y localidades de origen. Materiales y métodos. En su estado epimastigote, los parásitos se incubaron en medio de cultivo LIT (Liver Infusion Tryptose) con diferentes concentraciones de cada fármaco en ensayos por triplicado. El grado de sensibilidad se estimó a partir de las concentraciones inhibitorias del 50 y el 90% (IC50 e IC90) y se obtuvieron los valores promedio y la desviación estándar de cada cepa y fármaco. La significación estadística entre grupos se determinó mediante análisis de varianzas con el test no paramétrico de Wilcoxon/Kruskal-Wallis y valores de p<0,05. Resultados. Se observó un amplio rango de respuesta a los fármacos. Se identificaron dos grupos de parásitos (A y B) con diferencias significativas en la sensibilidad al benznidazol (p<0,0001), y tres grupos (A, B, C) en cuanto a la sensibilidad al nifurtimox y el posaconazol (p<0,0001). Conclusiones. En general, las cepas fueron más sensibles al nifurtimox que al benznidazol y el posaconazol. Estas diferencias evidencian la heterogeneidad de las poblaciones de T. cruzi que circulan en Paraguay, lo que debe considerarse en el tratamiento y el seguimiento de las personas afectadas.

Abstract: Introduction: Trypanosoma cruzi, the causative agent of Chagas disease, shows substantial phenotypic and genotypic heterogeneity, which can influence the epidemiological and clinical variations of the disease and the sensitivity to the drugs used in the treatment. Objective: To assess the in vitro susceptibility to benznidazole, nifurtimox, and posaconazole of 40 cloned strains of T. cruzi isolated in Paraguay belonging to different genotypes, hosts, and localities. Materials and methods: We incubated the parasites in their epimastigote stage in LIT culture medium with different concentrations of each drug in triplicate assays. The degree of susceptibility was estimated by the inhibitory concentrations of 50 and 90% (IC50 and IC90) to obtain the average values and the standard deviation for each strain and drug. We determined the statistical significance between groups by analysis of variances with the Wilcoxon/Kruskal-Wallis non-parametric test and values of p<0.05. Results: A wide range of drug response was observed. Two groups of parasites (A and B) were identified as having significant differences in susceptibility to benznidazole (p<0.0001), and three groups (A, B, C) to nifurtimox and posaconazole (p<0.0001). Conclusions: Overall, the isolates were more susceptible to nifurtimox than benznidazole and posaconazole. Such differences highlight the heterogeneity of T. cruzi populations circulating in Paraguay, an aspect to consider in the treatment and follow up of patients.

Mortalidad en pacientes diabéticos hospitalizados en el Hospital de Puyo, provincia Pastaza, Ecuador / Mortality in admitted diabetic patients in the Hospital of Puyo, Pastaza province, Ecuador

RESUMEN Fundamento: La diabetes mellitus es una enfermedad crónica que se caracteriza por el aumento sostenido de las cifras de glucemia. Es descrita como una de las principales causas de morbimortalidad a nivel mundial, así como de distintos grados de discapacidad y gran afectación de la calidad de vida relacionada con la salud. Objetivo: caracterizar la mortalidad en pacientes diabéticos hospitalizados en el Hospital General de Puyo. Métodos: estudio descriptivo, realizado en el Hospital de Puyo, provincia Pastaza, Ecuador, durante 2016 y 2017, con 168 pacientes, de los cuales 20 fueron fallecidos. Fuero revisadas las historias clínicas de cada uno de los casos incluidos en la investigación. Las variables del estudio fueron: sexo, edad, control glucémico, causa de ingreso, tiempo de evolución de la enfermedad y tiempo de hospitalización. Resultados: en los fallecidos, el promedio de edad fue de 72 años. Existió un predominio de pacientes femeninos (65,0 %), con tiempo de evolución de la enfermedad de más de tres años (90,0 %), y con un control glucémico inadecuado (70,0 %). Las enfermedades intercurrentes fueron las principales causas de ingresos y defunciones (75,0 %). Conclusión: los pacientes diabéticos fallecieron tuvieron como causa de ingreso más frecuente a las enfermedades intercurrentes, con más de 70 años de edad la mayoría de ellos, tiempo de evolución de enfermedad superior a los tres años y presencia de un control metabólico inadecuado.

ABSTRACT Foundation: Diabetes mellitus is a chronic disease which is characterized by a sustained increase in blood glucose levels. It is described as one of the main causes of morbidity and mortality worldwide, as well as responsable for different degrees of disability and a great impact on health-related quality of life. Objective: to characterize mortality in admitted diabetic patients in the General Hospital of Puyo. Methods: a descriptive study, carried out in the Hospital of Puyo, Pastaza province, Ecuador, during 2016 and 2017, with 168 patients, of which 20 were deceased. The medical records of each of the cases included in the study were reviewed. The variables were: sex, age, glycemic control, cause of admission, time of disease evolution and duration of admission. Results: in the deceased, the average age was 72 years. There was a predominance of female patients (65.0%), with time of evolution of the disease of more than three years (90.0%), and with an inadequate glycemic control (70.0%). Inter current diseases were the main causes of income and deaths (75.0%). Conclusion: diabetic patients who died had inter current diseases as the most frequent cause of admission, older than 70 years most of them, time of evolution of disease greater than three years and presence of an inadequate metabolic control.

Estudio preliminar sobre la repetibilidad in vivo de tres localizadores apicales electrónicos / Preliminary study about in vivo repeatability of three electronic apex locators

RESUMEN Introducción: La mayoría de los estudios han evaluado y comparado la exactitud de los localizadores apicales electrónicos pero pocos evaluaron la repetibilidad del método de medición; de estos casi todos son ex vivo. Objetivo: Comparar la repetibilidad in vivo de tres localizadores apicales electrónicos en dientes antero-superiores permanentes. Métodos: Se realizó un estudio observacional analítico de corte transversal en 14 pacientes adultos sanos de ambos sexos con indicación de tratamiento de conductos en una pieza dentaria antero-superior. La selección fue por casos consecutivos. Se utilizaron tres localizadores apicales electrónicos (Root ZX II, Canal Pro y RomiApex A-15) para realizar las mediciones de los conductos. Dos operadores independientes realizaron dos mediciones con cada localizador apical electrónico. Los datos se analizaron por medio de la prueba de Bland-Altman para la repetibilidad y la prueba de Friedman para comparar los localizadores apicales. Resultados: La edad media (desviación estándar) de los pacientes fue 28,79 (± 9,12) años; 8 (57,1 por ciento) pacientes fueron del sexo femenino. La media de las diferencias (límites de concordancia) de las mediciones para Root ZX, Canal Pro y RomiApex A-15 fueron 0,13 mm (± 0,42), 0,12 mm (± 0,88), y 0,18 (± 0,76) mm, respectivamente. Conclusiones. El Root ZX presentó el mayor grado de repetibilidad, seguido por el RomiApex. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los localizadores en cuanto a las diferencias absolutas entre la 1ra y 2da mediciones(AU)

ABSTRACT Introduction: Most studies have evaluated and compared the accuracy of electronic apex locators, but few have addressed the repeatability of the measurement method, and most are ex vivo. Objective: Compare the in vivo repeatability of three electronic apex locators in permanent upper front teeth. Methods: An analytic observational cross-sectional study was conducted of 14 healthy adult patients of both sexes with root canal therapy indicated in an upper front tooth. The consecutive case method was used to select the patients. Three electronic apex locators (Root ZX II, Canal Pro and RomiApex A-15) were used for root canal measurement. Two independent operators performed two measurements with each electronic apex locator. Data were analyzed using the Bland-Altman test to assess repeatability and the Friedman test to compare the apex locators. Results: Mean age (standard deviation) of the patients was 28.79 (± 9.12) years; 8 patients (57.1 percent) were female. The mean differences (limits of agreement) of the measurements made by Root ZX, Canal Pro and RomiApex A-15 were 0.13 mm (± 0.42), 0.12 mm (± 0.88) and 0.18 (± 0.76) mm, respectively. Conclusions: Root ZX displayed the highest repeatability, followed by RomiApex. Statistically significant variations were not found between the locators as to absolute differences between the 1st and 2nd measurement(AU)

Therapeutic response and safety of the topical, sequential use of antiseptic, keratolytic, and pentamidine creams (3-PACK) on Leishmania (Viannia) braziliensis-infected mice

BACKGROUND Topical treatment of New World cutaneous leishmaniasis can be affected by bacterial coinfection, hyperkeratosis, and transdermal drug delivery. OBJECTIVE The aim of this work was to evaluate the therapeutic response and safety of the topical, sequential use of antiseptic, keratolytic, and pentamidine isethionate (PMD) creams (3-PACK kit) on CL-infected BALB/c mice. METHODS A 0.5% chlorhexidine solution (CGH), 10% salicylic acid (SA), and 3% or 6% PMD were used as antiseptic, keratolytic, and antileishmanial drugs, respectively. During the first seven days, antiseptic, followed by 10% SA gel and PMD cream, were applied topically. Subsequently, treatment was performed only with the antiseptic and PMD creams. Skin irritation, reduction of lesion size (mm2), and parasitic load were observed until 30 days of treatment were completed. FINDINGS The 3-PACK treatment using 6% PMD induced a complete lesion reduction in 3/6 mice and a partial reduction in 1/6 mice, with no parasites observed. In contrast, CGH and SA alone, along with the vehicle, were not effective (p < 0.05). Moderate to severe erythema was observed at the application site. MAIN CONCLUSION The topical 3-PACK using 6% PMD was 67% effective in the treatment of CL by Leishmania (Viannia) braziliensis. Currently, work is ongoing to improve PMD isethionate formulation and to determine a dose-response.

Leishmaniasis cutánea inducida por especies de leishmanial Viannia en ratones BALB/c y eficacia de un tratamiento tópico / Cutaneous leishmaniasis by Leishmania Viannia species in BALB/c mice and efficacy of a topical treatment

Resumen Introducción: La diversidad de las formas clínicas de la leishmaniasis del Nuevo Mundo (desde formas cutáneas localizadas a diseminadas o formas mucosas) causada por especies del subgénero Viannia podría inferir en la eficacia de los tratamientos tópicos. El objetivo del presente trabajo fue determinar las características de la leishmaniasis cutánea producida por infecciones con Leishmania (V.) braziliensis y L.(V.) panamensis en ratones BALB/c y la eficacia de un mismo tratamiento tópico. Materiales y métodos: Después de la infección con cada una de las especies se realizó seguimiento de las lesiones determinando su tamaño (mm ) y características macroscópicas, cada siete días por 150 días. Las características histopatológicas (en lesiones y órganos) fueron determinadas 70, 106 y 150 días post-infección y la eficacia de un tratamiento tópico (cura de lesión y parasitológica) fue determinada después del tratamiento con un gel de miltefosina aplicado una vez al día por 20 días sobre las lesiones. Resultados: Se observó un aumento del tamaño de las lesiones en ambos grupos de ratones, sin embargo, un mayor tamaño de las lesiones e intensidad de la respuesta inflamatoria con menos alteraciones epidérmicas fue encontrada en los ratones infectados con L. (V.) braziliensis. En ningún grupo se encontraron parásitos en órganos (nódulos, bazo e hígado) ni diferencias en la efectividad del tratamiento tópico utilizado. Conclusión: La eficacia del tratamiento tópico utilizado no fue afectada por las diferencias macro y microscópicas encontradas en la leishmaniasis producida por las dos especies de Leishmania evaluadas.

Abstract Introduction: The efficacy of topical treatments could be affected by the diversity of clinical forms (localized or disseminated cutaneous forms, mucosal forms) of New World-leishmaniasis caused by species of Leishmania from the subgenus Viannia. The aim of this study was to determine the cutaneous leishmaniasis features produced after infection with Leishmania (V.) braziliensis and L. (V.) panamensis in BALB/c mice and to determine the efficacy of one topical treatment. Materials and methods: Cutaneous leishmaniasis lesions were followed up after infection determining their lesion-size (mm2) and other macroscopic characteristics every 7 days for 150 days. Histopathological patterns (in lesions and organs) were determined 70, 106 and 150 days post-infection and the efficacy (lesion and parasitological cure) of miltefosine gel applied topical once a day for 20 days was determined. Results: An increase of size-lesions was observed in both groups of mice, however, a higher lesion- size and inflammatory response but lower epidermal changes were observed in L. (V.) braziliensis compared with L. (V.) panamensis infected ones. No parasites were observed in organs (nodules, spleen and liver) and no differences were observed in the effectiveness of the used topical treatment. Conclusion: The efficacy of the topical treatment used was not affected by the macro and microscopic differences produced after infection by the two Leishmania species evaluated.

Evaluación de formulaciones de ketoconazol para uso tópico en leishmaniasis cutánea por Leishmania(Viannia) / Evaluation of ketoconazole formulations for topical use in cutaneous leishmaniasis caused by Leishmania (Viannia)

RESUMEN Se evaluó la efectividad de diversas formulaciones farmacéuticas de ketoconazol en modelos experimentales de leishmaniasis cutánea (LC) en ratones BALB C. Fueron preparadas formulaciones tópicas tipo gel, lipogel y crema conteniendo potenciadores de la permeación y diferentes concentraciones de ketoconazol. Se determinó la estabilidad, la toxicidad y la actividad anti-Leishmania in vitro. Además, se evaluó in vivo la efectividad de las formulaciones aplicadas tópicamente en ratones con LC infectados con Leishmania (Viannia) braziliensis. Las formulaciones tipo crema fueron evaluadas adicionalmente en ratones infectados con L. (V.) panamensis. Los sistemas evaluados mantuvieron in vitro la actividad del ketoconazol contra los parásitos; sin embargo, ninguna de las formulaciones fue efectiva en curar las lesiones de LC en los ratones. El tratamiento tópico con miltefosina (utilizado como control) curó las lesiones. Se concluye que las formulaciones que contienen ketoconazol diseñados en este estudio, no fueron efectivos contra la LC en los ratones infectados.

ABSTRACT The effectiveness of various pharmaceutical formulations of ketoconazole was evaluated in experimental models of cutaneous leishmaniasis (LC) in BALB C mice. Topical gel, lipogel, and cream formulations containing permeation enhancers and different concentrations of ketoconazole were prepared. Stability, toxicity and anti-Leishmania activity were determined in vitro. In addition, the effectiveness of topically applied formulations in LC-infected mice infected with Leishmania (Viannia) braziliensis was evaluated in vivo. Cream formulations were additionally evaluated in mice infected with L. (V.) panamensis. The systems evaluated maintained in vitro the activity of ketoconazole against parasites; however, none of the formulations were effective in curing LC lesions in mice. Topical treatment with miltefosine (used as a control) cured the lesions. It is concluded that the ketoconazole-containing formulations designed in this study were not effective against LC in infected mice.

Toxicidad, genotoxicidad y actividad anti-Leishmania de aceites esenciales obtenidos de cuatro (4) quimiotipos del género Lippia / Toxicity, genotoxicity and anti-Leishmania activity of essential oils obtained of four chemotypes of Lippia genus

Los aceites esenciales (AEs), pertenecientes al género Lippia, son candidatos interesantes de formulaciones tópicas en el tratamiento de la leishmaniasis cutánea (LC). El objetivo de este trabajo fue determinar el perfil toxicológico y la actividad anti-Leishmania de AEs obtenidos de plantas colombianas del género Lippia. Ratones BALB/c fueron tratados tópica u oralmente con AEs obtenidos de L. alba quimiotipo citral (AE1) y de L. origanoides quimiotipos timol (AE2), carvacrol (AE3) y felandreno (AE4). El efecto del tratamiento en la irritación de la piel, la toxicidad aguda oral, la genotoxicidad (prueba cometa y micronúcleos), los cambios en la función hepática y renal, la inducción de reacción de hipersensibilidad de contacto y en la actividad contra L. (V) panamensis y L. (V.) braziliensis fueron determinados. Todos los AEs presentaron un perfil toxicológico similar a los parámetros normales, exceptuando los aceites AE2 y AE3 los cuales fueron irritantes y presentaron algunos signos de toxicidad aguda oral al ser utilizados en altas concentraciones (concentraciones bajas no fueron tóxicas). El AE2 mostró actividad antiparasitaria en las formas parasitarias evaluadas. Concentraciones bajas de los AEs podrían utilizarse de forma segura como componentes de formulaciones farmacológicas en LC.

Essential oils (EOs) belonging to the genus Lippia are interesting candidates in pharmaceutical systems for cutaneous leishmaniasis (CL). The aim of this work was to determine both toxicological and antileishmanial activities of EOs obtained from different species of Lippia, a widely distributed Colombian plants. BALB/c mice were treated topically or orally with EOs obtained from L. alba citral chemotype (EO1) and L. origanoides thymol (EO2), carvacrol (EO3) and phellandrene (EO4) chemotypes. The skin irritation, oral acute toxicity, genotoxicity (comet assay and micronucleus test), liver and renal adverse effects, All the EOs showed a toxicological profile similar to the normal parameters, except for oils EO2 and EO3 which were irritant and showed some signs of acute oral toxicity at high concentrations (low concentration were safe). The EO2 showed antiparasitic activity. Low concentrations of the EO could be used safely as components of pharmacological formulations in CL.

Genotoxicidad del nifurtimox en diferentes líneas celulares utilizando el ensayo cometa / Genotoxiciyt from Nifurtimox in comet assay

El nifurtimox es un 5-nitrofurano sintético utilizado en el tratamiento dela enfermedad de Chagas. El objetivo de este estudio fue determinar la toxicidad celular y el daño del ADN causado por el nifurtimox en células Vero, J774, NIH/3T3 y THP-1. Se utilizó la coloración vital con azul tripan y elmétodo colorimétrico MTT para determinar la toxicidad y el ensayo cometa alcalino para determinar el daño al ADN. Los cometas fueron contadosen un microscopio de fluorescencia y el porcentaje de daño total del ADN fue calculado y clasificado de 0 (sin daño) a 4 (daño severo). En el ensayo de toxicidad, las células J774 fueron las líneas celulares más sensibles y las células THP-1 las menos sensibles al nifurtimox con valores de CC50 34,04-138,58 μg/ml y CC90 130,58->300 μg/ml de nifurtimox, respectivamente.En el ensayo cometa, el porcentaje de daño total de ADN a 100 μg/ml de nifurtimox fue 79,75%, 85,30% y 10,25% en células NIH/3T3, J774 y THP-1 respectivamente. En las células Vero el daño del ADN fue del 80% en células tratadas y no tratadas. El nifurtimox presentó toxicidad y genotoxicidad con actividades que dependieron del tipo de célula y de la concentración del medicamento utilizada. Es importante tomar en cuenta estas diferencias al realizar conclusiones finales de resultados obtenidos utilizando estos ensayos, especialmente el ensayo cometa...

Cell accumulation and antileishmanial effect of exogenous and endogenous protoporphyrin IX after photodynamic treatment / Acumulación celular y efecto anti- Leishmania de la protoporfirina IX exógena y endógena después del tratamiento fotodinámico

Introduction: Photodynamic therapy (PDT) using 5-aminolevulinic acid-induced protoporphyrin IX (ALA-PpIX) constitutes an interesting alternative for cutaneous leishmaniasis treatment. Objective: To evaluate the production of PpIXbased on the administration of ALA and MAL and the effect of ALA-PDTat cellular level on non-infected and infected THP-1 cells using Leishmania ( Viannia ) panamensis or Leishmania ( Leishmania ) infantum (syn Leishmania chagasi ) parasites. Materials and methods: Protoporphyrin IX (PpIX) production and mitochondrial colocalization were evaluated by confocal microscopy. Cell toxicities were evaluated after treatment with the compounds, followed by light irradiation (597-752 nm) at 2.5 J/cm 2 fluency using a colorimetric MTT assay for THP-1 cells and a standard microscopic analysis of parasites. Results were expressed as compound concentration activity against 50% of cells or parasites (CC 50 or IC 50 ). Results: ALA or MAL induced an endogenous PpIX with a red fluorescence localized mainly in the mitochondria inside human cells. ALA and MAL-PDT induced a similar range of toxicities on THP-1 cells (CC 50 0.16±0.01mM and 0.33±0.019 mM, respectively) without any apparent inhibition of intracellular parasites in the infected cells as compared to untreated controls. Exogenous PpIX-PDT was toxic to THP-1 cells (CC 50 0.00032±0.00002 mM), L. (L.) infantum (IC 50 0.003±0.0001 mM) and L. (V.) panamensis (IC 50 0.024±0.0001 mM) promastigotes. Conclusions: Despite the effectiveness of exogenous PpIX on promastigotes and the production of PpIX by human infected cells, treatment with ALA or MAL before irradiation was unable to completely destroy L. (L.) infantum or L. (V.) panamensis intracellular amastigotes.

Introducción. El tratamiento fotodinámico con ácido 5-aminolevulínico como inductor de la protoporfirina IX (ALA-PpIX) constituye una alternativa interesante en el tratamiento de la leishmaniasis cutánea. Objetivo. Evaluar la producción de protoporfirina IX (PpIX) a partir de la administración de ALA o MAL y el efecto de la PDT con ALA a nivel celular en células THP-1 no infectadas e infectadas con Leishmania ( Viannia ) panamensis o Leishmania ( Leishmania ) infantum (syn. Leishmania chagasi ). Materiales y métodos. La producción de protoporfirina IX y su ‘colocalización´ mitocondrial se evaluaron mediante microscopía ‘confocal´. Se evaluó la toxicidad celular después del tratamiento con los compuestos y la aplicación de irradiación de luz (597-752 nm) en una fluencia de 2,5 J/cm 2 mediante el empleo de la prueba colorimétrica con metil-tiazol-tetrazolio (MTT) en las células, y de métodos microscópicos estándar en los parásitos. Los resultados se expresaron como la concentración del compuesto activo en el 50 % de las células o parásitos (CC 50 o CI 50 ). Resultados. El ácido aminolevulínico o el metil-5-aminolevulinato indujeron la protoporfirina IX endógena en células humanas, y se observó fluorescencia de color rojo en las mitocondrias. La actividad del ácido aminolevulínico y del metil-5-aminolevulinato utilizados con terapia fotodinámica fue similar en las células THP-1 (CC 50 0,16±0,01 mM y 0,33±0,019 mM, respectivamente) y, aparentemente, no inhibió los parásitos en las células infectadas, en comparación con los controles. El tratamiento exógeno con protoporfirina IX y terapia fotodinámica fue tóxico para las células THP-1 (CC 50 0,00032 ±0,00002 mM) y para los promastigotes de L. (L .) infantum (IC 50 0,003±0,0001 mM) y L. ( V .) panamensis (CI 50 0,024±0,0001 mM). Conclusiones. A pesar de la ‘fotoactividad´ del tratamiento con protoporfirina IX en promastigotes y de su producción después del tratamiento con ácido aminolevulínico y metil-5-aminolevulinato en las células infectadas con Leishmania , no se observó daño en los amastigotes presentes en las células de L. ( L .) infantum o L . ( V .) panamensis .

Permeación en piel humana de una nanoemulsión de ftalocianina de aluminio clorada para la optimización de tratamientos tópicos de leishmaniasis cutánea / Human Skin Permeation of a Chloroaluminum Phthalocyanine Nanoemulsion for Optimization of Topical Cutaneous Leishmaniasis Formulations / Permeação em pele humana de uma nanoemulsão de ftalocianina de alumínio clorada para a otimização de tratamentos tópicos de leishmaniose cutânea

Introducción: Las nanoemulsiones son excelentes sistemas de transporte y entrega de fármacos. La ftalocianina de aluminio clorada (PcAlCl) en terapia fotodinámica constituye una alternativa de tratamiento en leishmaniasis cutánea. Objetivo: Determinar la difusión y retención en piel humana de la PcAlCl contenida en una nanoemulsión (nano-PcAlCl) para su optimización en formulaciones tópicas. Materiales y métodos: Se prepararon y caracterizaron fisico-químicamente dos formulaciones (nano-PcAlCl y solución-PcAlCl) y sus vehículos sin-PcAlCl. La permeación se determinó en ensayos en celdas de difusión de Franz y la retención por el método de la cinta adhesiva. La concentración de PcAlCl fue determinada fluorométricamente (nM/cm2). Biopsias de piel fueron analizadas histotécnicamente. Resultados: El tamaño promedio, el potencial Z y el índice de polidispersión de la nano-PcAlCl en agua fue de 132,9 nm, -19,23 y 0,14 y diluida en PBS fue 125,33 nm, -13,69 y 0,139. Las concentraciones de PcAlCl se mantuvieron estables. La PcAlCl no atravesó la piel y fue retenida en sus capas, en estrato córneo y epidermis+dermis con valores de 44,17 nM y 8,48 nM postratamiento con nano-PcAlCl, y 96,90 nM y 9,80 nM postratamiento con solución-PcAlCl. Esta última promovió mayor retención en estrato córneo y ambas formulaciones promovieron similar retención en epidermis+dermis. Se observó desprendimiento del estrato córneo y fragmentación del colágeno. Conclusión: La PcAlCl no atravesó la piel, se retuvo en estrato córneo y epidermis+dermis. Se sugiere realizar ensayos de permeación utilizando piel humana desprovista de estrato córneo y ensayos de distribución en animales con leishmaniasis cutánea.

Introduction: The nanoemulsions constitute excellent drug delivery systems for carrying and delivering active drugs. Chloroaluminum phthalocyanine (ClAlPc) in photodynamic therapy constitutes an interesting alternative in cutaneous leishmaniasis treatment. Objective: To determine the diffusion and retention of ClAlPc contained in a nanoemulsion (nano-ClAlPc) in human skin membranes for optimization of topical formulations. Materials and methods: Two formulations (ClAlPc-nano- and ClAlPc-solution) and vehicles without ClAlPc were prepared and physicochemical characterized. The permeation was tested in Franz-diffusion cells and the retention by the tape stripping method. ClAlPc concentration was determined fluorometrically (nM/cm2). Skin biopsies were analyzed by histologic technics. Results: The ClAlPc-nano average size, zeta potential and polydispersity index diluted in water was 132.9 nm, -19.23 and 0.14 and diluted in phosphate-buffer-saline was 25.33 nm, -13.69 and 0.139. ClAlPc maintains its stability in each formulation. ClAlPc was unable to pass completely through the skin; it was retained in the different skin layers. A ClAlPc retention in stratum corneum and epidermis+dermis was observed with values of 44.17 nM and 8.48 nM after ClAlPc-nano treatment and 96.90 nM and 9.80 nM after ClAlPc-solution treatment. The ClAlPc-solution promoted greater retention in stratum corneum and both formulations showed similar ClAlPc-retention in epidermis+dermis. Histological changes as stratum corneum detachment and collagen-fragmentation were observed. Conclusion: ClAlPc was not able to cross completely the skin, it was retained in stratum corneum and epidermis+dermis Human permeation test using skin membranes without stratum corneum, and distribution assays in cutaneous leishmaniasis-infected animals, are suggested.

Introdução: as nanoemulsões são excelentes sistemas de transporte e entrega de fármacos. A ftalocianina de alumínio clorada (PcAlCl) em terapia fotodinâmica constitui uma alternativa de tratamento em leishmaniose cutânea. Objetivo: determinar a difusão e retenção em pele humana da PcAlCl contida em uma nanoemulsão (nano-PcAlCl) para sua otimização em formulações tópicas. Materiais e métodos: se prepararam e caracterizaram fisico-quimicamente duas formulações (nano-PcAlCl e solução-PcAlCl) e seus veículos sem-PcAlCl. A permeação determinou-se em ensaios em celas de difusão de Franz e a retenção pelo método da fita adesiva. A concentração de PcAlCl foi determinada fluorometricamente (nM/cm²). Biopsias de pele foram analisadas histotecnicamente. Resultados: o tamanho médio, o potencial Z e o índice de polidispersão da nano-PcAlCl em água foi de 132,9 nm, -19,23 e 0,14 e diluída em PBS foi 125,33 nm, -13,69 e 0,139. As concentrações de PcAlCl mantiveram-se estáveis. A PcAlCl não atravessou a pele, foi retido em suas capas. A PcAlCl foi retida em estrato córneo e epiderme+derme com valores de 44,17 nM e 8,48 nM pós-tratamento com nano-PcAlCl e 96,90 nM e 9,80 nM pós-tratamento com solução-PcAlCl. A solução-PcAlCl promoveu maior retenção em estrato córneo e ambas as formulações promoveram similar retenção em epiderme+derme. Observou-se desprendimento do estrato córneo e fragmentação do colágeno. Conclusão: a PcAlCl não atravessou a pele; reteve-se em estrato córneo e epiderme+derme. Sugere-se realizar ensaios de permeação utilizando pele humana desprovida de estrato córneo e ensaios de distribuição em animais com leishmaniose cutânea.

Actividad antiparasitaria de extractos de plantas colombianas de la familia Euphorbiaceae

Introducción: La familia Euphorbiaceae es un grupo heterogéneo de plantas distribuidas en el territorio colombiano utilizadas algunas de ellas, como plantas medicinales. Objetivo: Determinar la actividad tóxica de aceites esenciales (AE) y extractos de plantas obtenidos de la familia Euphorbiaceae contra tripanosomátidos. Materiales y métodos: Los AE de Croton pedicellatus Kunth (AE1) y C.leptostachyus Kunth (AE2) y el extracto de Phyllanthus acuminatus Vahl fueron obtenidos por hidrodestilación asistida por la radiación de microondas y maceración con metanol; se caracterizaron por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. Fueron evaluados contra las formas extracelulares e intracelulares de Trypanosoma cruzi, Leishmania (Viannia) panamensis, L. (V.) braziliensis y células Vero y THP-1. La actividad antiparasitaria fue determinada por recuento microscópico y el efecto tóxico en células por la prueba colorimétrica de MTT. Los resultados fueron expresados como la concentración que inhibe (CI50) o destruye (CC50) el 50% de parásitos o células. Resultados: Los componentes mayoritarios de los AE fueron borneol, γ-terpineno, germacreno D y trans-ß-cariofileno. Los AE1 y AE2 inhibieron el crecimiento de epimastigotes de T.cruzi y de promastigotesde L. (V.) panamensis y L. (V.) braziliensis con CI50 entre 7,14-8,78μg/mL y fueron activos contra amastigotes intracelulares de L. (V.) braziliensis (AE1:CI50 36,74 y AE2:19,77μg/mL). El extracto 1 mostró baja actividad contra los parásitos. Los AE y extractosmostraron toxicidad en células THP-1(CC50 9,29-64,12μg/mL) y células Vero (CC50 24,86-3,52μg/mL). Conclusión: Los AE obtenidos de plantas de la familia de Euphorbiaceae mostraron actividad antiparasitaria con toxicidad moderada en células de mamífero.

Introduction: The Euphorbiaceae family is a heterogeneous group of plants distributed in the Colombian territory used for medicinal proposes. Objective: To determine the toxic activity of Euphorbiaceae family essential oils and plant extract against tripanosomatides. Materials and methods: Essential oil from Croton pedicellatus Kunth (EO1) and C.leptostachyus Kunth(EO 2) and plant extract from Phyllanthus acuminatus Vahl (Ext1) were obtained by microwave-assisted hidrodistillation and characterized by gas chromatography coupled with mass spectrometry and methanol maceration. They were assessed against extracellular and intracellular forms of Trypanosoma cruzi, Leishmania(Viannia) panamensis, L.(Viannia)braziliensis and Vero and THP-1 cells. The parasite activity was determined by microscopic counting and cell toxicity by MTT colorimetric test. The results were expressed as the inhibitory (ICz50) or citotoxic (CC50) concentration for 50% of parasites or cells. Results: The EO-major components were borneol, γ-terpinene and trans-ß-caryophyllene. The EO1 and EO2 inhibited both T.cruzi-epimastigotes and L(V.) panamensis and L.(V.) brazilienses promastigotes growth with IC50 between 7.14 to 8.78 μg/mL They were active against intracellular amastigotes of L. (V.) braziliensis (EO1:IC50:36.74 and EO2:19.77μg/mL). The Ext 1 showed low activity against both parasites. The EOs and extracts were partially toxic to THP-1 (CC50 9.29 to 64.12μg/mL) and Vero cells (CC50 24.86 to 63.52μg/mL). Conclusions: The EO obtained from plants of the Euphorbiaceae family showed antiparasitic activity with some toxicity against mammalian cells.

Chemical composition and antiprotozoal activities of Colombian Lippia spp essential oils and their major components

The chemical composition and biological activities of 19 essential oils and seven of their major components were tested against free and intracellular forms of Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi parasites as well as Vero and THP-1 mammalian cell lines. The essential oils were obtained from different species of Lippia, a widely distributed genus of Colombian plants. They were extracted by microwave radiation-assisted hydro-distillation and characterised by GC-FID and GC-MS. The major components were geranial, neral, limonene, nerol, carvacrol, p-cymene, ã-terpinene, carvone and thymol. The essential oil of Lippia alba exhibited the highest activity against T. cruzi epimastigotes and intracellular amastigotes with an IC50 of 5.5 ìg/mL and 12.2 ìg/mL, respectively. The essential oil of Lippia origanoides had an IC50 of 4.4 ìg/mL in L. chagasi promastigotes and exhibited no toxicity in mammalian cells. Thymol (IC50 3.2 ± 0.4 ìg/mL) and S-carvone (IC50 6.1 ± 2.2 ìg/mL), two of the major components of the active essential oils, were active on intracellular amastigotes of T. cruziinfected Vero cells, with a selective index greater than 10. None of the essential oils or major components tested in this study was active on amastigotes of L. chagasi infected THP-1 cells.

Composición química y actividad anti-tripanosomal de aceites esenciales obtenidos de Tagetes (Fam. Asteraceae), recolectados en Colombia / Chemical composition and anti-tripanosomal activity of essential oils from Tagetes (Asteraceae Fam) grown in Colombia

Introducción: La quimioterapia actual para enfermedad de Chagas es precaria con solo dos opciones de tratamiento: nifurtimox y benznidazol. Las plantas representan una fuente inmensa de moléculas potencialmente activas contra agentes infecciosos. Objetivo: Determinar la composición química y evaluar la actividad de aceites esenciales de Tagetes, recolectados en Colombia, contra Trypanosoma cruzi y su célula de mamífero hospedera. Materiales y métodos: Los aceites esenciales se obtuvieron de plantas colectadas en diversas regiones de Colombia; se extrajeron por hidrodestilación asistida por la radiación de microondas y se caracterizaron por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. La actividad de siete (7) aceites esenciales se determinó en epimastigotes, amastigotes intracelulares de T. cruzi y en células Vero. Los resultados fueron expresando como la concentración que inhibe (CI50, CI90) o destruye (CC50, CC90) 50 ó 90 % de parásitos o células. Resultados: Los componentes mayoritarios de los aceites fueron estragol, dihidrotagetona y cis-tagetona con diferencias de composición entre las especies de Tagetes evaluadas. Todos los aceites esenciales fueron activos en epimastigotes de T. cruzi. El aceite de T. heterocarpha fue activo en amastigotes intracelulares (CI50:41.35 µg/mL). Los aceites de T. caracasana y T. heterocarpha fueron tóxicos para las células Vero. Conclusiones: Los aceites esenciales obtenidos de T. heterocarpha, T. caracasana y T. zipaquirensis mostraron capacidad para inhibir el crecimiento de T. cruzi. Estudios complementarios de sus componentes mayoritarios se realizan actualmente.

Introduction: The current chemotheraphy of Chagas diseases is poor, with only two treatment options: nifurtimox and benznidazole. The plants represent an immense source of potentially active molecules against infectious agents. Aim: To determine the chemical composition and biological activity of Colombian Tagetes essential oils against Trypanosoma cruzi and its mammalian host cell. Materials and methods: Plants were collected in various region of Colombia and essential oils were extracted by microwave-assisted hidrodistillation and characterized by gas chromatography coupled with mass spectrometry. The activities of seven (7) essentials oils were determinate in epimastigotes and amastigotes of T. cruzi and on Vero cells. The result were expressed as the concentration to inhibit (IC50 IC90) or destroy (CC50 CC9) 50 or 90 % of parasites or cells. Results: Estragole, dihidrotagetone and cis-tagetone were the main components of essential oils, with quantitative differences between the evaluated Tagetes species. All essential oils were active in epimastigotes of T. cruzi. T. heterocarpha essential oil was active in intracellular amastigotes (IC50:41.35 µg/mL). The oils from T. caracasana y T. heterocarpha were toxic to Vero cells. Conclusions: The essential oils obtained from T. heterocarpha, T. caracasana and T. zipaquirensis inhibit the growth of T. cruzi. Additional studies on the major components activities against parasites are now under study.

In vitro susceptibility of Trypanosoma cruzi strains from Santander, Colombia, to hexadecylphosphocholine (miltefosine), nifurtimox and benznidazole

Introduction. The current chemotherapy for Chagas disease is unsatisfactory with only two drugs available for treatment. Research to discover new drugs for Chagas disease is urgent. Hexadecyl-phosphocholine (HPC, miltefosine) has been demonstrated to have in vitro activity against Trypanosoma cruzi parasites, but its activity on different Colombian T. cruzi strains is not known. Objective. To evaluate the in vitro susceptibility of T. cruzi strains isolated from humans and vectors in Santander, Colombia, to miltefosine, nifurtimox and benznidazole. Materials and methods. Eight T. cruzi Colombian strains and three reference strains (Esmeraldo, SilvioX10 and Y) were studied. Drug activities against extracellular epimastigotes and intracellular amastigotes were determined by microscopic counting. The results were expressed as the concentrations that inhibited 50% and 90% growth (IC50 and IC90). Results. For miltefosine a similar range of drug activity was observed against all the Colombian strains, all parasites being more susceptible to miltefosine than to the reference drugs. The intracellular amastigotes were more susceptible to miltefosine (IC50 0.08 to 0.63 ìM and IC90 0.21 to 2.21 ìM) than extracellular forms (IC50 <0.92 to 2.29 ìM and IC90 1.38 to 4.76 ìM). For reference drugs, parasites were more susceptible to nifurtimox than to benznidazole and some differences in activity of benznidazole between T. cruzi strains was observed. Conclusions. The results showed the significant in vitro activity of miltefosine against T. cruzi stages, and the expected results for the reference drugs. Further in vivo studies with miltefosine are planned.

Introducción. Los tratamientos actuales para la enfermedad de Chagas son insatisfactorios y sólo existen dos medicamentos disponibles. La búsqueda de alternativas terapéuticas es prioritaria. La hexadecilfosfocolina (miltefosina) ha mostrado actividad in vitro contra Trypanosoma cruzi. Sin embargo, su actividad en aislamientos de T. cruzi obtenidos en Colombia aún no ha sido reportada. Objetivo. Evaluar la susceptibilidad in vitro a miltefosina, nifurtimox y benznidazole de cepas de T. cruzi aisladas de humanos y vectores en Santander, Colombia. Materiales y métodos. Se evaluó la susceptibilidad de los tres medicamentos en ocho cepas colombianas de T. cruzi y tres cepas de referencia: Esmeraldo, Silvio X10 y Y. La actividad de los compuestos fue determinada en epimastigotes extracelulares y amastigotes intracelulares, por conteo microscópico. Los resultados se expresaron en concentraciones inhibitorias 50 y 90 (CI50 y CI90). Resultados. Para la miltefosina, se observaron rangos similares en la actividad del medicamento entre las cepas colombianas; todos los parásitos fueron más susceptibles a la miltefosina que a los medicamentos de referencia. Los amastigotes intracelulares fueron más sensibles a la miltefosina (CI50, 0,08 a 0,63 µM y CI90, 0,21 a 2,21 µM) que las formas extracelulares (CI50, <0,92 a 2,29 µM y CI90, 1,38 a 4,76 µM). En los medicamentos de referencia, los parásitos fueron más susceptibles al nifurtimox que al benznidazole. Se observaron algunas diferencias en la actividad del benznidazole en las cepas estudiadas de T. cruzi. Conclusiones. Los resultados obtenidos de la actividad in vitro de miltefosina y de los medicamentos de referencia contra aislamientos de T. cruzi son satisfactorios y serán considerados en estudios posteriores in vivo.

Efecto fototoxico de la terapia fotodinamica en promastigotes de leishmania amazonensis / Phototoxic effect of photodynamic therapy in promastigotes of Leishmania amazonensis

Introducción: La terapia fotodinámica utiliza un compuesto fotosensibilizador que en presencia de luz y oxígeno produciendo especies reactivas de oxígeno induciendo la muerte de la célula blanco por apoptosis o necrosis. Estudios in vitro han mostrado que la ftalocianina de aluminio es fototóxica para Leishmania spp. Objetivo:El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto del tratamiento con ftalocianina de aluminio clorada en los cambios morfológicos y de la actividad mitocondrial en promastigotes de Leishmania amazonensis. Materiales y métodos: Promastigotes de L amazonensis fueron incubados con ftalocianina de aluminio clorada y posteriormente irradiados con una fluencia de 17 Julios/cm2. De 0, 12 y 24 horas post irradiación los parásitos fueron contados microscópicamente para determinar la inhibición del crecimiento, fueron coloreados con Giemsa para determinar el efecto en los cambios morfológicos y fueron tratados con la sonda fluorescente JC-1 para determinar los cambios en la actividad mitocondrial. Resultados: El tratamiento fotodinámico inhibió el número de promastigotes hasta en un 96,37 %. Se observó reducción del tamaño, fragmentación nuclear y pérdida de núcleo y/o kinetoplasto y pérdida de la actividad mitocondrial. Conclusiones: La terapia fotodinámica es efectiva para la eliminación de promastigotes de L.amazonensis posiblemente por un mecanismo similar a la apoptosis.

Introduction: Photodynamic therapy uses a photosensitizer compound that in presence of light and molecular oxygen is activated producing reactive oxygen species and target cell death by apoptosis or necrosis. In vitro studies have demonstrated the phototoxic effect of aluminium phthalocyanine on Leishmania spp. Objective: The purpose of this study was to determine the effect of chloroaluminum phthalocyanine in the morphological and mitochondrial activity changes of Leishmania amazonensis promastigotes. Materials and methods: Parasites incubated with chloroaluminum phthalocyanine were irradiated with a fluency of 2.5 Julios/cm2. After 0, 12 and 24 hours post irradiation, they were counted microscopically to determine the percentage of inhibition; stained with Giemsa to determine the morphological changes; and treated with the fluorescent probe JC-1 to determine changes in activity mitochondrial. Results: Phothodynamic treatment inhibited the number of promastigotes reaching values of 96.37 %. There was observed downsizing, nuclear fragmentation and loss of nuclear core and / or kinetoplast and loss of mitochondrial activity immediately after irradiation. Conclusions: Photodynamic therapy is effective in eliminating promastigotes of L. amazonensis probably by an apoptosis like mechanism.